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Elabscience细胞死亡大盘点-细胞凋亡

人阅读 发布时间:2023-10-31 11:12

人体内的细胞总是处于不断更新的过程中,这个过程也伴有原有细胞的死亡,其中一部分细胞通过自然衰老途径死亡,还有一些细胞是通过非衰老途径死亡。细胞死亡方式多种多样,如细胞凋亡、细胞自噬、细胞焦亡、铜死亡、铁死亡等

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今天以细胞凋亡开始,为大家做一个细胞死亡方式的盘点,帮助大家更加全面地理解细胞死亡方式。
 

细胞凋亡
 

细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡或细胞自杀,是细胞在基因控制下主动死亡的过程。细胞凋亡不会释放细胞内容物到周围环境中,因此与细胞坏死有明显的区别。

细胞凋亡普遍存在于生物界,既在正常生理状态下发生,也在病理状态下发生。它在胚胎发育及形态发生、组织内正常细胞群的稳定、机体的防御及免疫反应中起着重要的作用,因此也是近年来生物医学研究的热点。

细胞凋亡过程

图1.细胞凋亡过程

 

细胞凋亡的特征

 

在细胞凋亡过程中,会产生许多种标志性的生理现象。随着凋亡程度的进一步加深,产生的生理现象也各有不同。

 

早凋时期细胞膜结构发生改变,细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻、Bcl-2等凋亡相关蛋白激活、胞内Caspase酶激活、线粒体膜电势崩溃等。

凋亡中期亚G1期细胞群增加。

晚凋时期细胞核皱缩、DNA片段化、细胞膜出芽,形成凋亡小体。

细胞凋亡发生过程特征示意图

图2.细胞凋亡发生过程特征示意图

 

细胞凋亡的常见检测方式

 

以细胞凋亡过程中产生的不同生理变化为依据,可采用不同的检测方法来进行细胞凋亡的检测。

 

01 显微镜观察

显微镜下可观察到细胞凋亡的形态学变化,可通过HE染色、吖啶橙染色、台盼蓝染色通过光学显微镜或者荧光显微镜进行观察,通过颜色或者胞核胞质状态检测细胞凋亡。

 

图3.电子显微镜观察Jurkat细胞凋亡过程中核染色质的形态学改变(图源网络)

02 Annexin V检测细胞膜PS外翻

细胞发生早期凋亡时,细胞膜上的PS外翻。AnnexinV是一种蛋白,可与PS进行结合。当细胞发生凋亡时,可利用连接荧光染料的Annexin V与外翻的PS结合,通过检测荧光基团的信号判定凋亡发生情况。

 

03 检测凋亡过程中激活的蛋白

在细胞膜失去对称性后,细胞内的某些凋亡相关蛋白被激活,如Bcl-2、BAX、FASL/TNFSF6、TNF-α 等,可通过ELISA等方法测定细胞内被激活的蛋白,以判断细胞是否处于凋亡状态。

 

04 Caspase酶活性检测

细胞凋亡早期,存在于细胞质内的Caspase被激活,从而引发一系列凋亡相关级联反应,可通过检测Caspase的活力来判定细胞凋亡情况。

 

05 JC-1检测线粒体膜电位变化

正常细胞线粒体膜电位较高,JC-1可聚集发出红色荧光;当细胞发生凋亡时,线粒体膜电位降低,JC-1无法聚集,便以绿色单体存在。可通过检测线粒体膜电位变化来判断凋亡发生情况。

 

06 TUNEL检测DNA断裂情况

细胞凋亡晚期,DNA片段化,断裂的DNA暴露出的3’-OH可以被末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)催化,与荧光素标记的dUTP结合。可通过TUNEL试剂盒检测DNA是否发生片段化,判定细胞凋亡。

 

Elabscience可提供哪些凋亡检测试剂?

 

名称

货号

用途

Annexin V-FITC / PI细胞凋亡检测试剂盒

E-CK-A211

细胞早期凋亡检测

Annexin V-APC / 7-AAD细胞凋亡检测试剂盒

E-CK-A218

细胞早期凋亡检测

Caspase 3/7活性检测试剂盒(分光光度法)

E-CK-A383

细胞早期凋亡检测

Caspase 8活性检测试剂盒(分光光度法)

E-CK-A388

细胞早期凋亡检测

Caspase 9活性检测试剂盒(分光光度法)

E-CK-A313

细胞早期凋亡检测

线粒体膜电位检测试剂盒

E-CK-A301

细胞早期凋亡检测

一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒(绿色,FITC)

E-CK-A320

细胞晚期凋亡检测

一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒(红色,Elab Fluor® 594)

E-CK-A322

细胞晚期凋亡检测

一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒(绿色,Elab Fluor® 488)

E-CK-A421

细胞晚期凋亡检测

一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒(红色,Elab Fluor® 594)

E-CK-A422

细胞晚期凋亡检测

FASL/TNFSF6(Factor Related Apoptosis Ligand) ELISA试剂盒

E-EL-H0068c

细胞凋亡检测

E-EL-M0028c

TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA试剂盒

E-EL-H0109c

细胞凋亡检测

E-EL-M3063

E-EL-R2856c

E-EL-P0010c

E-MSEL-M0002

ATP含量化学发光法测试盒

E-BC-F002

细胞晚期凋亡检测

还原型谷胱甘肽(GSH)比色法测试盒

E-BC-K030-M

细胞早期凋亡检测

总谷胱甘肽(T-GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)比色法测试盒

E-BC-K097-M

细胞早期凋亡检测

活性氧(ROS)荧光法测试盒

E-BC-K138-F

细胞早期凋亡检测

NADP+/NADPH比色法测试盒

E-BC-K803-M

细胞早期凋亡检测

抑制与产生超氧阴离子自由基比色法测试盒(WST-1法)

E-BC-K001-M

细胞早期凋亡检测

 

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