在生命科学研究领域，细胞活性与毒性检测是评估细胞状态、药物效果及环境因素影响的关键环节。无论是基础的细胞生物学研究，还是临床前的药物筛选、类器官药敏实验，都需要一种高效、精准且便捷的活死细胞区分工具。Elabscience Calcein AM/PI活死细胞双染试剂盒（货号：E-CK-A354）凭借其独特的检测原理与优异性能，成为众多科研人员的理想选择，为细胞活性研究提供可靠技术支撑。
Calcein AM/PI活死细胞双染试剂盒专注于细胞活力与细胞毒性检测，可广泛应用于生命科学多个研究方向，满足不同场景下的实验需求：
- 基础细胞生物学研究：如细胞培养过程中细胞状态监测、细胞凋亡机制探究，可通过双染结果直观观察细胞存活比例与活力变化。
- 药物筛选与药敏实验：在肿瘤细胞药敏测试、小分子化合物毒性评估中，能快速判断药物对细胞的杀伤效果，为药物研发提供量化数据。
- 环境与化学因素毒性检测：评估重金属离子、有机溶剂（如 DMSO）等对细胞的毒性影响，例如文献中通过该试剂盒检测不同浓度 DMSO 处理后 4T1 细胞、Hela 细胞的存活情况。
- 干细胞与类器官研究：虽需预实验验证，但可探索用于干细胞活性评估、类器官药敏实验（需提前去除基质胶以避免干扰），为前沿研究提供潜在工具。
试剂盒的核心优势源于其科学的双荧光标记机制，利用活细胞与死细胞的生理特性差异实现精准区分，具体原理如下：
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活细胞的绿色荧光标记（Calcein AM）
Calcein AM 是一种疏水性荧光探针，可轻松穿透活细胞的细胞膜。进入细胞后，其分子上的乙酰甲氧基甲酯（AM）基团会被细胞内源性酯酶水解，生成具有强负电荷的极性分子 Calcein。由于 Calcein 无法穿透细胞膜，会滞留在细胞内并发出强绿色荧光（激发波长 Ex=494nm，发射波长 Em=517nm），因此
活细胞会被特异性标记为绿色。而死细胞缺乏活性酯酶，无法有效水解 Calcein AM，故不产生绿色荧光或荧光极弱。
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死细胞的红色荧光标记（PI）
碘化丙啶（PI）是一种亲水性核酸染料，无法穿透活细胞完整的细胞膜。但死细胞的细胞膜选择透过性丧失，PI 可进入胞内并与双链 DNA 特异性结合，产生强烈的红色荧光（Ex=535nm，Em=617nm），从而
死细胞被特异性标记为红色。
通过 Calcein AM 与 PI 的联合使用，可在同一体系中同时实现活细胞（绿色）与死细胞（红色）的双重染色，结合流式细胞仪（检测通道：FITC、PE/PerCP/Cy5.5）或荧光显微镜（滤光片：FITC、TRITC），即可快速量化细胞活力与毒性水平。
在生命科学研究中，细胞活性是反映细胞生理功能的核心指标，其检测准确性直接影响实验结论的可靠性。传统活死细胞检测方法（如台盼蓝染色）虽操作简单，但仅能通过细胞形态初步判断，无法实现荧光级别的精准区分与量化分析；单一荧光染色法则难以同时排除死细胞干扰与细胞碎片影响。
随着流式细胞术、荧光显微镜等技术的普及，科研人员对活死细胞检测的 “精准性、高效性、兼容性” 提出更高要求：不仅需要快速区分活死细胞，还需与其他荧光标记（如抗体标记的 APC、PE 通道）兼容，同时适应不同样本类型（如贴壁细胞、悬浮细胞、类器官）的检测需求。Elabscience® Calcein AM/PI 双染试剂盒正是基于这一需求研发，通过双荧光特异性标记，解决了传统方法的局限性，成为现代细胞生物学研究的重要工具。
相比同类产品，Calcein AM/PI活死细胞双染试剂盒在性能与使用体验上展现出多重优势，为科研实验提供便利：
- 检测高效，耗时短：整个检测流程仅需 30 分钟，染色后 1-2 小时内荧光稳定性良好（流式检测 2 小时内荧光强度无明显降低），可快速获取实验结果，提升研究效率。
- 无需洗涤，操作便捷：未进入细胞的 Calcein AM 几乎无荧光，上机前无需洗涤步骤，减少操作误差与细胞损失，尤其适合对细胞状态敏感的实验。
- 荧光稳定，抗淬灭性强：Calcein 与 PI 的荧光信号稳定，若需长期培养，染色后避光置于 CO₂培养箱，48 小时内仍可检测；荧光显微镜拍照时，降低光强、增加曝光时间并及时关闭荧光开关，可进一步减少光漂白，延长荧光寿命。
- 规格灵活，适配不同实验需求：提供 100 Assays、500 Assays、2000 Assays 三种规格，适配 96 孔板（100μL / 孔）、24 孔板（200μL / 孔）等不同培养容器，100 Assays 规格可满足约 125 个流式样本或 50 个 24 孔板样本的检测需求。
- 保存条件友好，有效期长：试剂盒在 - 20℃避光条件下可保存 12 个月，Calcein AM 原液分装后 - 80℃保存有效期更长，频繁使用时置于 - 20℃即可，降低试剂浪费。
Calcein AM/PI活死细胞双染试剂盒已被多篇高分 SCI 论文引用，其性能在肿瘤治疗、材料生物相容性、干细胞研究等领域得到验证，部分代表性文献如下：
无论是基础科研还是应用研究，Elabscience® Calcein AM/PI 活死细胞双染试剂盒都能以其精准、高效的性能，为细胞活性检测提供有力支持。如需进一步探索其在特定实验场景（如类器官研究、多荧光通道兼容）中的应用，建议通过预实验优化条件，充分发挥试剂盒的优势，助力科研突破！
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