2025诺贝尔奖引领Treg细胞研究-Treg细胞与Foxp3检测指南

2025年诺贝尔生理学或医学奖授予了玛丽・E・布伦科（Mary E. Brunkow）、弗雷德・拉姆斯德尔（Fred Ramsdell）及坂口志文（Shimon Sakaguchi）。这三位科学家在调节性T细胞（Tregs）及其关键调控因子Foxp3研究中做出了开创性贡献。这些发现不仅重塑了人们对免疫调控的认知，更推动了针对自身免疫病、癌症及移植排斥的创新疗法发展。随着Treg细胞在生物学的重要性日益凸显，精准识别与评估Tregs及其核心转录因子Foxp3，成为基础科研与临床转化不可或缺的一环。

一、Foxp3与Treg检测：精准研究的基石

Foxp3是Treg细胞发育、维持及抑制功能的核心转录因子，其表达与功能状态直接决定了Treg的活性。因此，有效、可靠的检测方法是深入研究Treg在机体中作用机制的前提。目前，针对Foxp3和Treg的检测已形成一套多层次的系统方法。

Foxp3检测方法

Foxp3蛋白检测：流式细胞术凭借其单细胞分辨率和高通量优势，成为同时分析Treg表面标志物（如CD4，CD25）及细胞内Foxp3表达的shou选方法。免疫组织化学（IHC）则能提供Treg在组织原位（如肿瘤微环境）的空间分布信息，对于评估肿瘤或自身免疫微环境中Tregs的浸润情况具有重要价值。蛋白质印迹法（Western blot）可检测细胞裂解液中的总Foxp3蛋白。

Foxp3基因表达分析：RT-qPCR可用于检测Foxp3的mRNA转录水平，适用于评估不同实验条件下Foxp3的转录调控。

Fig. 1. C57BL/6 mouse splenocytes were surface stained with Elab Fluor^® Violet 450 Anti-Mouse CD45, PE/Cyanine7 Anti-Mouse CD45R/B220, FITC Anti-Mouse CD3, Elab Fluor^® Red 780 Anti-Mouse CD4, PerCP Anti-Mouse CD8a and APC Anti-Mouse CD25 and then treated with Foxp3/Transcription Factor Staining Kit.Cells were then stained with PE Anti-Mouse Foxp3, followed by analysise via flow cytometry. Regulatory T cells (Treg cells) exhibit the phenotype of CD45⁺CD45R/B220^-CD3⁺CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺.

Treg细胞检测工具与策略

与单一的Foxp3检测不同，对调节性T细胞（Tregs）的评估需采用多维度策略。

1. 表型分析：通过标志物组合（如CD4⁺CD25^hiCD127^lFoxp3⁺）鉴定Treg群体，并利用CTLA-4、GITR等进行更深层次的亚型分型。

2. 功能验证：共培养抑制试验是评估Treg免疫抑制功能的金标准，而对其分泌的抑制性细胞因子（如IL-10，TGF-β）的分析则揭示了其作用机制。

3. Treg功能与表观遗传分析：Foxp3基因座Treg特异性去甲基化区域（TSDR）的分析，可作为鉴定稳定Treg谱系的表观遗传学标志。

整合这些方法，能够对Treg的鉴定、数量与功能进行全面评估。

Fig. 2. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were stained with Elab Fluor^® Violet 450 Anti-Human CD45, Elab Fluor^® Red 780 Anti-Human CD3, FITC Anti-Human CD4, PerCP/Cyanine5.5 Anti-Human CD8, PE Anti-Human CD25 and APC Anti-Human CD127, followed by analysise via flow cytometry. Regulatory T cells (Treg cells) exhibit the phenotype of CD45⁺CD3⁺CD4⁺CD127^LOW/-CD25⁺.

二、研究挑战与工具进化

Treg细胞存在显著的异质性，尤其在组织驻留亚群中，其表型和功能受局部微环境深刻影响，这种异质性要求研究工具必须具备区分功能各异Treg亚群的能力。同时，Foxp3蛋白的活性还受到多种翻译后修饰的精密调控。这些复杂性对检测工具提出了更高要求，促使技术方向往能够解析Treg亚群、代谢状态及特定蛋白修饰等更深层次发展。

为支持科研工作者对Treg进行深入精准的探索，Elabscience^®提供了一系列经过验证的高品质抗体及试剂，涵盖从样本制备、细胞分选到多色流式分析和细胞内因子检测的全流程。

Table 1. 人与小鼠调节性T细胞（Tregs）流式多色分析方案推荐

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Table 2. 人与小鼠Treg研究相关试剂

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从诺贝尔奖的里程碑发现到持续的研究创新，对Treg细胞的深入探索离不开精准可靠的检测工具。随着对Foxp3和Treg生物学理解的加深，Elabscience^®将继续致力于提供先进的解决方案，助力科研人员在自身免疫、癌症免疫治疗等领域取得新的突破。