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聚焦2025诺奖Treg研究新方向!Elabscience详解Foxp3与Treg检测方法,提供Treg研究解决方案,助力免疫机制探索。

93 人阅读发布时间:2025-10-27 17:25

2025年诺贝尔生理学或医学奖授予了玛丽E布伦科(Mary E. Brunkow)、雷德拉姆斯德尔(Fred Ramsdell)及坂口志文(Shimon Sakaguchi这三位科学家在调节性T细胞(Tregs)及其关键调控因子Foxp3研究中做出了开创性贡献。这些发现不仅重塑了人们对免疫调控的认知,更推动了针对自身免疫病、癌症及移植排斥的创新疗法发展。随着Treg细胞生物学的重要性日益凸显,精准识别与评估Tregs及其核心转录因子Foxp3,成为基础科研与临床转化不可或缺的一环。

 

Foxp3Treg检测:精准研究的基石

Foxp3Treg细胞发育、维持及抑制功能的核心转录因子,其表达与功能状态直接决定了Treg的活性。因此,有效、可靠的检测方法是深入研究Treg机体中作用机制的前提目前,针对Foxp3Treg的检测已形成一套多层次的系统方法

 

Foxp3检测方法

Foxp3蛋白检测流式细胞术凭借其单细胞分辨率和高通量优势,成为同时分析Treg表面标志物(如CD4CD25)及细胞内Foxp3表达的首xuan方法。免疫组织化学(IHC则能提供Treg在组织原位(如肿瘤微环境)的空间分布信息,对于评估肿瘤或自身免疫微环境中Tregs的浸润情况具有重要价值蛋白质印迹法(Western blot)可检测细胞裂解液中的总Foxp3蛋白。

Foxp3基因表达分析RT-qPCR可用于检测Foxp3mRNA转录水平,适用于评估不同实验条件下Foxp3的转录调控。

聚焦2025诺奖Treg研究新方向!Elabscience详解Foxp3与Treg检测方法,提供Treg研究解决方案,助力免疫机制探索。

Fig. 1C57BL/6 mouse splenocytes were surface stained with Elab Fluor® Violet 450 Anti-Mouse CD45, PE/Cyanine7 Anti-Mouse CD45R/B220, FITC Anti-Mouse CD3, Elab Fluor® Red 780 Anti-Mouse CD4, PerCP Anti-Mouse CD8a and APC Anti-Mouse CD25 and then treated with Foxp3/Transcription Factor Staining Kit.Cells were then stained with PE Anti-Mouse Foxp3, followed by analysise via flow cytometry. Regulatory T cells (Treg cells) exhibit the phenotype of CD45+CD45R/B220-CD3+CD4+CD25+Foxp3+.

 

Treg细胞检测工具与策略

与单一的Foxp3检测不同对调节性T细胞(Tregs)的评估需采用多维度策略

1. 表型分析通过标志物组合(如CD4+CD25hiCD127lFoxp3+)鉴定Treg群体,并利用CTLA-4GITR等进行更深层次的亚型分型。

2. 功能验证共培养抑制试验是评估Treg免疫抑制功能的金标准,而对其分泌的抑制性细胞因子(如IL-10TGF-β)的分析则揭示了作用机制。

3. Treg功能与表观遗传分析Foxp3基因座Treg特异性去甲基化区域(TSDR的分析,可作为鉴定稳定Treg谱系的表观遗传学标志。

整合这些方法,能够对Treg鉴定数量与功能进行全面评估

聚焦2025诺奖Treg研究新方向!Elabscience详解Foxp3与Treg检测方法,提供Treg研究解决方案,助力免疫机制探索。

Fig. 2. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were stained with Elab Fluor® Violet 450 Anti-Human CD45, Elab Fluor® Red 780 Anti-Human CD3, FITC Anti-Human CD4, PerCP/Cyanine5.5 Anti-Human CD8, PE Anti-Human CD25 and APC Anti-Human CD127, followed by analysise via flow cytometry. Regulatory T cells (Treg cells) exhibit the phenotype of CD45+CD3+CD4+CD127LOW/-CD25+.

 

研究挑战与工具进化

Treg细胞存在显著的异质性,尤其在组织驻留亚群中,其表型和功能受局部微环境深刻影响这种异质性要求研究工具必须具备区分功能各异Treg亚群的能力。同时,Foxp3蛋白的活性还受到多种翻译后修饰的精密调控。这些复杂性对检测工具提出了更高要求,促使技术能够解析Treg亚群、代谢状态及特定蛋白修饰等更深层次发展。

 

Elabscience® Treg研究解决方案

为支持科研工作者对Treg进行深入精准的探索,Elabscience®提供了一系列经过验证的高品质抗体试剂,涵盖从样本制备、细胞分选到多色流式分析和细胞内因子检测的全流程。

Table 1. 人与小鼠调节性T细胞Tregs流式多色分析方案推荐

Marker

Clone

Fluorochrome

Cat. No.

Species Reactivity

CD45

HI30

Elab Fluor® Violet 450

E-AB-F1137Q

Human

CD3

UCHT1

Elab Fluor® Red 780

E-AB-F1230S

Human

CD4

SK3

FITC

E-AB-F1352C

Human

CD8

OKT-8

PerCP/Cyanine5.5

E-AB-F1110J

Human

CD25

BC96

PE

E-AB-F1194D

Human

CD127

A019D5

APC

E-AB-F1152E

Human

Foxp3

FJK-16s

PE

E-AB-F1351D

Mouse

CD45R/B220

RA3.3A 1/6.1

PE/Cyanine7

E-AB-F1112H

Mouse

CD25

PC-61.5.3

APC

E-AB-F1102E

Mouse

CD4

GK1.5

Elab Fluor® Red 780

E-AB-F1097S

Mouse

CD45

30-F11

Elab Fluor® Violet 450

E-AB-F1136Q

Mouse

CD3

17A2

FITC

E-AB-F1013C

Mouse

CD8a

53-6.7

PerCP

E-AB-F1104F

Mouse

 

Table 2. 人与小鼠Treg研究相关试剂

Product Name

Cat. No.

Cell Stimulation and Protein Transport Inhibitor Kit

E-CK-A091

Human PBMC Separation Solution (P 1.077)

E-CK-A103

10×ACK Lysis Buffer

E-CK-A105

Foxp3/Transcription Factor Staining Kit

E-CK-A108

Intracellular Fixation/Permeabilization Buffer Kit

E-CK-A109

EasySort™ Mouse CD4+T Cell Isolation Kit

MIM002N

EasySort™ Mouse CD8+T Cell Isolation Kit

MIM003N

EasySort™ Human CD3+T Cell Isolation Kit

MIH001N

EasySort™ Mouse CD3+T Cell Isolation Kit

MIM001N

EasySortTM Mouse Pan-Naïve T Cell Isolation Kit

MIM006N

EasySortTM Mouse naïve CD4+T Cell Isolation Kit

MIM007N

EasySortTM Mouse naïve CD8+T Cell Isolation Kit

MIM008N

Human CD3/CD28 T Cell Activation Beads

MIH001A

Mouse CD3/CD28 T Cell Activation Beads

MIM001A

 
 

从诺贝尔奖的里程碑发现到持续的研究创新,对Treg细胞的深入探索离不开精准可靠的检测工具。随着对Foxp3Treg生物学理解的加深,Elabscience®将继续致力于提供先进的解决方案,助力科研人员在自身免疫、癌症免疫治疗等领域取得新的突破。

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