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93 人阅读发布时间:2025-10-27 17:25
2025年诺贝尔生理学或医学奖授予了玛丽・E・布伦科(Mary E. Brunkow)、弗雷德・拉姆斯德尔(Fred Ramsdell)及坂口志文(Shimon Sakaguchi)。这三位科学家在调节性T细胞(Tregs)及其关键调控因子Foxp3研究中做出了开创性贡献。这些发现不仅重塑了人们对免疫调控的认知,更推动了针对自身免疫病、癌症及移植排斥的创新疗法发展。随着Treg细胞在生物学的重要性日益凸显,精准识别与评估Tregs及其核心转录因子Foxp3,成为基础科研与临床转化不可或缺的一环。
Foxp3是Treg细胞发育、维持及抑制功能的核心转录因子,其表达与功能状态直接决定了Treg的活性。因此,有效、可靠的检测方法是深入研究Treg在机体中作用机制的前提。目前,针对Foxp3和Treg的检测已形成一套多层次的系统方法。
Foxp3蛋白检测:流式细胞术凭借其单细胞分辨率和高通量优势,成为同时分析Treg表面标志物(如CD4,CD25)及细胞内Foxp3表达的首xuan方法。免疫组织化学(IHC)则能提供Treg在组织原位(如肿瘤微环境)的空间分布信息,对于评估肿瘤或自身免疫微环境中Tregs的浸润情况具有重要价值。蛋白质印迹法(Western blot)可检测细胞裂解液中的总Foxp3蛋白。
Foxp3基因表达分析:RT-qPCR可用于检测Foxp3的mRNA转录水平,适用于评估不同实验条件下Foxp3的转录调控。

Fig. 1. C57BL/6 mouse splenocytes were surface stained with Elab Fluor® Violet 450 Anti-Mouse CD45, PE/Cyanine7 Anti-Mouse CD45R/B220, FITC Anti-Mouse CD3, Elab Fluor® Red 780 Anti-Mouse CD4, PerCP Anti-Mouse CD8a and APC Anti-Mouse CD25 and then treated with Foxp3/Transcription Factor Staining Kit.Cells were then stained with PE Anti-Mouse Foxp3, followed by analysise via flow cytometry. Regulatory T cells (Treg cells) exhibit the phenotype of CD45+CD45R/B220-CD3+CD4+CD25+Foxp3+.
与单一的Foxp3检测不同,对调节性T细胞(Tregs)的评估需采用多维度策略。
1. 表型分析:通过标志物组合(如CD4+CD25hiCD127lFoxp3+)鉴定Treg群体,并利用CTLA-4、GITR等进行更深层次的亚型分型。
2. 功能验证:共培养抑制试验是评估Treg免疫抑制功能的金标准,而对其分泌的抑制性细胞因子(如IL-10,TGF-β)的分析则揭示了其作用机制。
3. Treg功能与表观遗传分析:Foxp3基因座Treg特异性去甲基化区域(TSDR)的分析,可作为鉴定稳定Treg谱系的表观遗传学标志。
整合这些方法,能够对Treg的鉴定、数量与功能进行全面评估。

Fig. 2. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were stained with Elab Fluor® Violet 450 Anti-Human CD45, Elab Fluor® Red 780 Anti-Human CD3, FITC Anti-Human CD4, PerCP/Cyanine5.5 Anti-Human CD8, PE Anti-Human CD25 and APC Anti-Human CD127, followed by analysise via flow cytometry. Regulatory T cells (Treg cells) exhibit the phenotype of CD45+CD3+CD4+CD127LOW/-CD25+.
Treg细胞存在显著的异质性,尤其在组织驻留亚群中,其表型和功能受局部微环境深刻影响,这种异质性要求研究工具必须具备区分功能各异Treg亚群的能力。同时,Foxp3蛋白的活性还受到多种翻译后修饰的精密调控。这些复杂性对检测工具提出了更高要求,促使技术方向往能够解析Treg亚群、代谢状态及特定蛋白修饰等更深层次发展。
为支持科研工作者对Treg进行深入精准的探索,Elabscience®提供了一系列经过验证的高品质抗体及试剂,涵盖从样本制备、细胞分选到多色流式分析和细胞内因子检测的全流程。
|
Marker |
Clone |
Fluorochrome |
Cat. No. |
Species Reactivity |
|
CD45 |
HI30 |
Elab Fluor® Violet 450 |
E-AB-F1137Q |
Human |
|
CD3 |
UCHT1 |
Elab Fluor® Red 780 |
E-AB-F1230S |
Human |
|
CD4 |
SK3 |
FITC |
E-AB-F1352C |
Human |
|
CD8 |
OKT-8 |
PerCP/Cyanine5.5 |
E-AB-F1110J |
Human |
|
CD25 |
BC96 |
PE |
E-AB-F1194D |
Human |
|
CD127 |
A019D5 |
APC |
E-AB-F1152E |
Human |
|
Foxp3 |
FJK-16s |
PE |
E-AB-F1351D |
Mouse |
|
CD45R/B220 |
RA3.3A 1/6.1 |
PE/Cyanine7 |
E-AB-F1112H |
Mouse |
|
CD25 |
PC-61.5.3 |
APC |
E-AB-F1102E |
Mouse |
|
CD4 |
GK1.5 |
Elab Fluor® Red 780 |
E-AB-F1097S |
Mouse |
|
CD45 |
30-F11 |
Elab Fluor® Violet 450 |
E-AB-F1136Q |
Mouse |
|
CD3 |
17A2 |
FITC |
E-AB-F1013C |
Mouse |
|
CD8a |
53-6.7 |
PerCP |
E-AB-F1104F |
Mouse |
|
Product Name |
Cat. No. |
|
Cell Stimulation and Protein Transport Inhibitor Kit |
E-CK-A091 |
|
Human PBMC Separation Solution (P 1.077) |
E-CK-A103 |
|
10×ACK Lysis Buffer |
E-CK-A105 |
|
Foxp3/Transcription Factor Staining Kit |
E-CK-A108 |
|
Intracellular Fixation/Permeabilization Buffer Kit |
E-CK-A109 |
|
EasySort™ Mouse CD4+T Cell Isolation Kit |
MIM002N |
|
EasySort™ Mouse CD8+T Cell Isolation Kit |
MIM003N |
|
EasySort™ Human CD3+T Cell Isolation Kit |
MIH001N |
|
EasySort™ Mouse CD3+T Cell Isolation Kit |
MIM001N |
|
EasySortTM Mouse Pan-Naïve T Cell Isolation Kit |
MIM006N |
|
EasySortTM Mouse naïve CD4+T Cell Isolation Kit |
MIM007N |
|
EasySortTM Mouse naïve CD8+T Cell Isolation Kit |
MIM008N |
|
Human CD3/CD28 T Cell Activation Beads |
MIH001A |
|
Mouse CD3/CD28 T Cell Activation Beads |
MIM001A |
从诺贝尔奖的里程碑发现到持续的研究创新,对Treg细胞的深入探索离不开精准可靠的检测工具。随着对Foxp3和Treg生物学理解的加深,Elabscience®将继续致力于提供先进的解决方案,助力科研人员在自身免疫、癌症免疫治疗等领域取得新的突破。