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Elabscience 小鼠脾脏 Treg细胞(3 色)检测方案,精准助力免疫细胞研究

197 人阅读发布时间:2025-10-13 16:58

一、Treg细胞简介

Treg细胞,全称调节性T细胞(Regulatory T cells),是一类具有显著免疫抑制作用的T细胞亚群。当机体在面对外来入侵的细菌、病毒等有害物质时,会产生免疫应答反应。部分免疫细胞(如T细胞及B细胞)会识别和清除有害物质,从而保护机体。然而,过度的免疫应答反应会损伤机体自身,在免疫细胞识别和清除了有害物质后,Treg细胞会发出攻击停止信号,通过释放免疫抑制性细胞因子和杀伤分子,抑制效应性T细胞增殖,同时诱导效应性T细胞凋亡,对免疫反应进行调节。Treg细胞在机体免疫反应过程中不可或缺,它可调节机体免疫稳态,从而阻止自身免疫性疾病。

 

二、Treg细胞鉴定方法介绍

在许多免疫疾病研究中,常常需要检测Treg细胞,对机体的免疫情况进行研究。要检测淋巴细胞中的Treg细胞,可以通过流式细胞术和流式抗体进行检测。目前最常用的鉴别Tregs的标志Marker是CD4、CD25、CD127和Foxp3。以下为检测人和小鼠Treg细胞的参考案例。

目的

样本

设置

调电压

1

Blank(空白管)

调补偿

2

CD45-Elab Fluor® Violet 450

3

CD3-Elab Fluor® Red 780

4

CD4-FITC

5

CD8a-PerCP/Cyanine5.5

6

CD25-PE

7

CD127-Elab Fluor®647

Full Panel

8

CD45-Elab Fluor® Violet 450、CD3-Elab Fluor® Red 780、CD4-FITC、CD8a-PerCP/Cyanine5.5、CD25-PE、CD127-Elab Fluor®647

 

指标

荧光标记

克隆号

货号

CD45

Elab Fluor® Violet 450

HI30

E-AB-F1137Q

CD3

Elab Fluor® Red 780

OKT3

E-AB-F1001S

CD4

FITC

RPA-T4

E-AB-F1109C

CD8a

PerCP/Cyanine5.5

OKT-8

E-AB-F1110J

CD25

PE

BC96

E-AB-F1194D

CD127

Elab Fluor®647

A019D5

E-AB-F1152M

人外周血Treg(6色)检测

1. 传统的通过检测Foxp3鉴定Treg的方法操作相对复杂,且固定破膜步骤对实验者要求较高,目前流行通过CD127来检测人Treg。

2. 增加CD45指标,便于淋巴细胞圈门,直接通过CD45和SSC圈出淋巴细胞门,分析CD4+CD25+CD127-/low的细胞比例,正常人外周血中Treg细胞在淋巴细胞中占比为3%~10%。

3. 需要设置单阳管用于调节补偿。

三、Treg细胞鉴定意义及应用

自身免疫性疾病:检测及关注淋巴细胞内Treg细胞状态,可以帮助研究多种领域疾病,如I型糖尿病等,这些自身免疫性疾病与Treg细胞相关。

炎症Treg细胞可以分泌细胞抗炎因子抑制自身炎症反应,防止引起组织破坏的病理性免疫应答发生。Treg细胞功能缺陷或缺失可直接导致炎症性疾病的出现。因此,在炎症类疾病中,Treg细胞发挥着重要的作用。

肿瘤研究:在关于肿瘤的研究中发现,Treg细胞可通过免疫抑制作用,使机体对肿瘤细胞产生抗原耐受,使得肿瘤细胞逃脱机体的免疫杀伤作用,导致免疫逃逸。因此,在关于肿瘤治疗的研究中,Treg细胞的鉴定及检测也具有重要的意义。

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