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研究发现，CD4+CD25+纯化的细胞中，CD127与Foxp3的表达呈负相关。通过CD4⁺CD127^low纯化出的CD4⁺CD25⁺ T细胞，与Foxp3纯化的CD4⁺CD25⁺ T细胞数量相似，并且这部分细胞展现了CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的典型特征。CD4⁺CD25⁺CD127^-/low是较CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺更优的特异性检测Tregs的表面标记分子。

配色方案

细胞亚群	种属	指标	荧光标记	克隆号
Treg	Human	CD45	Elab Fluor^{^®} Violet 450	HI30
		CD3	Elab Fluor^{^®}Red 780	OKT3
		CD4	FITC	RPA-T4
		CD8a	PerCP/Cyanine5.5	OKT-8
		CD25	PE	BC96
		CD127	Elab Fluor^{^®}647	A019D5

人Treg鉴定所需流式抗体

产品名称	荧光素	货号	规格
CD45	Elab Fluor^{^®} Violet 450	E-AB-F1137Q	20T
CD3	Elab Fluor^{^®}Red 780	E-AB-F1001S	20T
CD4	FITC	E-AB-F1109C	20T
CD8a	PerCP/Cyanine5.5	E-AB-F1110J	20T
CD25	PE	E-AB-F1194D	20T
CD127	Elab Fluor^{^®}647	E-AB-F1152M	20T

人Treg鉴定所需辅助试剂

作用

货号

名称

规格

细胞染色

缓冲液

E-CK-A107

Cell Staining Buffer

100mL

红细胞

裂解液

E-CK-A105

10×ACK Lysis Buffer

100mL

目的	样本	设置
调电压	1	Blank（空白管）
调补偿	2	CD45-Elab Fluor^{^®}Violet 450
	3	CD3-Elab Fluor^{^®}Red 780
	4	CD4-FITC
	5	CD8a-PerCP/Cyanine5.5
	6	CD25-PE
	7	CD127-Elab Fluor^{^®}647
Full Panel	8	CD45-Elab Fluor^{^®}Violet 450、CD3-Elab Fluor^{^®}Red 780、CD4-FITC、CD8a-PerCP/Cyanine5.5、CD25-PE、CD127-Elab Fluor^{^®}647

指标	荧光标记	克隆号	货号
CD45	Elab Fluor^{^®}Violet 450	HI30	E-AB-F1137Q
CD3	Elab Fluor^{^®}Red 780	OKT3	E-AB-F1001S
CD4	FITC	RPA-T4	E-AB-F1109C
CD8a	PerCP/Cyanine5.5	OKT-8	E-AB-F1110J
CD25	PE	BC96	E-AB-F1194D
CD127	Elab Fluor^{^®}647	A019D5	E-AB-F1152M

人外周血Treg（6色）检测

1. 传统的通过检测Foxp3鉴定Treg的方法操作相对复杂，且固定破膜步骤对实验者要求较高，目前流行通过CD127来检测人Treg。

2. 增加CD45指标，便于淋巴细胞圈门，直接通过CD45和SSC圈出淋巴细胞门，分析CD4⁺CD25⁺CD127^-/low的细胞比例，正常人外周血中Treg细胞在淋巴细胞中占比为3%~10%。

3. 需要设置单阳管用于调节补偿。

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