Elabscience新品上新 | 15 min高纯度分选，轻松搞定M2极化和NK细胞体外扩增！

免疫细胞体外培养是肿瘤免疫、炎症代谢、细胞治疗研发的关键基石。而其中M2型巨噬细胞极化诱导、原代NK细胞体外扩增培养的实验一直是科研圈内公认难点：如细胞存活率低、M2极化效率参差不齐、NK增殖乏力、批次间实验重复性差等。这些难点导致大量宝贵原代样本白白损耗，拖慢课题与项目进度。

为针对性解决该实验难题，Elabscience^®推出适配M2巨噬细胞极化和NK细胞体外培养的阴性分选试剂盒，形成从高纯度、纯天rang细胞的分选，到诱导分化、扩增培养和细胞鉴定的一体化解决方案。

一、产品内容

Elabscience^®小鼠单核细胞阴性分选试剂盒和人NK细胞阴性分选试剂盒通过阴性分选法从新鲜的小鼠脾脏和新鲜人外周血PBMC细胞样本中分别分离出小鼠单核细胞和人NK细胞。本试剂盒的原理是选用不同的生物素（Biotin）标记单克隆抗体对非目的细胞（非Naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞）进行标记，而后通过链霉亲和素标记的磁珠对非目标细胞进行清除，从而达到分离单核细胞和NK细胞的目的。它可以保持目的细胞未受刺激的原始状态，得到的细胞不带有任何抗体和磁珠标记，可直接进行下游应用。试剂盒产品信息如下：

二、产品优势

• 样本无需裂红处理，细胞活性更有保证。

• 无刺激，分选目的细胞无抗体和磁珠标记，细胞状态不受影响。

• 纯度高，分选后细胞纯度大于95%。

• 无需分离柱进行分离。

• 实验耗时短，最快15分钟可完成阴性细胞分选。

• 可用于分新鲜人PBMC样本或冻存PBMC样本。

三、结果展示

图1.小鼠骨髓单核细胞分选和纯度检测结果。如图所示，从C57BL/6小鼠骨髓细胞中分选单核细胞（Lineage-（CD3,CD45R,CD117,CD170,NK1.1）CD11b⁺Ly6G^-Ly6C^hi/lo），小鼠骨髓细胞分选前后用APC Anti-Mouse CD3 Antibody[17A2] (E-AB-F1013E)、APC Anti-Mouse CD45R (B220) Antibody[RA3-6B2] (AN00428E)、APC Anti-Mouse CD117/c-Kit Antibody[2B8] (E-AB-F1092E)/ APC Anti-Mouse CD170 Antibody[S17007L] (AN00629E)/ APC Anti-Mouse CD161/NK1.1 Antibody[PK136] (E-AB-F0987E)/ PE Anti-Mouse/Human/Monkey CD11b Antibody[M1/70] (E-AB-F1081D)/ Elab Fluor^® Violet 450 Anti-Mouse Ly6G Antibody[1A8] (E-AB-F1108Q)和FITC Anti-Mouse Ly6C Antibody[Monts 1] (E-AB-F1121C)进行检测，分选前后单核细胞比例分别为17.75%和97.41%。

图2. 小鼠骨髓单核细胞体外极化M2模型实验结果。如图所示，从C57BL/6小鼠骨髓细胞中分选出高纯度的单核细胞后，采用IL-4（20 ng/mL）联合IL-13（20 ng/mL）分别诱导培养3 d、7 d以极化M2型巨噬细胞。形态学观察可见，相较无细胞因子的未诱导空白组，极化后的细胞呈现明显的M2型巨噬细胞特征，细胞贴壁生长，呈细长的纺锤形，突起少、胞质致密空泡少；流式结果表明极化后的M2巨噬细胞高表达M2标志物CD206。

注：更多品系小鼠和其他样本的分选检测请咨询Elabscience^®技术团队。详细的实验操作流程请参考产品说明书：EasySort™ Mouse Monocyte Isolation Kit（货号：MIM010N）。

NK细胞体外扩增培养及杀伤活性检测方案

图3. 人外周血PBMC中NK细胞的分选和纯度检测实验结果。如上图所示，分选前后的NK细胞纯度进行流式细胞术分析，分选前后NK细胞比例分别为15.82%和95.39%。

图4. NK细胞杀伤功能检测实验结果。如图所示，从人外周血PBMC中分选出高纯度的NK细胞，将NK细胞和靶细胞（Jurkat细胞）分别按照1:1/3:1/10:1的比例混合培养24 h后收集细胞，检测Jurkat细胞的增殖及死亡情况。DAPI染色结果显示，相较于对照组，共培养体系中DAPI阳性的死亡Jurkat细胞数量显著升高，NK细胞共培养可明显抑制Jurkat细胞增殖。

本次上新的两款分选试剂盒，兼顾操作效率与细胞质量，完美适配M2型巨噬细胞极化、NK 细胞功能研究。 后续Elabscience^®也将继续推出小鼠CD4阳性分选试剂盒和小鼠CD4记忆细胞阴性分选试剂盒。如有相关的细胞分选和体外培养方案的需求，欢迎小伙伴们在评论区或后台留言，小E将及时解答。

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